组织培养繁殖法
用组织培养繁殖蝴蝶兰是当今蝴蝶兰工厂化生产常用的方法之一,具有繁殖快、数量大和小苗品种纯的优点。可以说,当今花卉市场上出售的蝴蝶兰均是用组织培养繁殖的组培苗培育的。
蝴蝶兰的组织培养繁殖要在实验室内进行,所需的设备、工具、药物和操作技术复杂,其具体步骤如下:
1、主要设备和工具
无菌操作台1座、高温高压蒸汽灭菌锅1个、酸碱度剂1支、酒精灯1盏、天秤1台、量筒1个、镊子1支、解剖刀1把、培养皿1批、培养瓶1批、70%酒精(消毒用)1瓶、药棉少许、解剖镜1台。
2、培养基配方与制备
用于蝴蝶兰组织培养繁殖的培养基配方有多个,最常用的有:
花宝1号(Hyponex 1) 3.5克
蔗糖
25克
烟酸
1毫克
维生素B1
1毫克
肌醇
100毫克
激动素
10毫克
细胞分裂素
10毫升
琼脂
12克
鲜苹果汁
100毫升
蒸馏水
900毫升
以上配方酸碱度应调至PH值5.2~5.4,装入培养瓶前应进行高压消毒。
3、操作技术
将花梗剪下,选取基部4~5节,每节带芽切成约5厘米小段,除去节间苞片,以0.5%次氯酸钠溶液消毒15分钟,捞起再用灭菌水充分清洗,放在培养皿中,以解剖刀将二端各切去0.5厘米后,立即将其芽体朝上插入培养基中,封口后置于27~30度,人工光照2000~3000勒克司的培养室内,每天16个小时,6~8周可长出芽体和叶片。待长出3~5片叶时便可出瓶种植。
由于第一次所得的花梗组培苗十分有限,无法满足工厂化大规模种植所需,所以就要将第一次组培苗长出的嫩叶(在培养瓶内)切成几段,然后再将其放入另一个培养瓶内,平铺于配制好的培养基上,封口消毒即可。
在组培室内培养6~8周,叶段四周就会长出许多原球体。这些原球体可被反复切割到另瓶培养,从而获得大量的优质组培苗。